多肽合成藥物如何做結(jié)構(gòu)確證研究
發(fā)布時(shí)間：2020-09-15 06:23:40瀏覽次數(shù)：
研究多肽結(jié)構(gòu)的主要目的是解釋其氨基酸組成和序列是否正確，如果多肽分子中含有胱氨酸，則應(yīng)澄清其狀態(tài)(氧化態(tài)或還原態(tài))，并確定含有多種半胱氨酸的多肽的正確的二硫鍵連接位點(diǎn)。對(duì)于某些長(zhǎng)肽，可能還需要利用核磁共振(NMR)、圓二色譜等方法來研究它們的空間結(jié)構(gòu)(如二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu))。
對(duì)于短肽，元素分析、紅外光譜、核磁共振波譜、氨基酸組成分析、質(zhì)譜等常用方法有時(shí)足以解釋它們的結(jié)構(gòu)特征。如果從上述測(cè)試中獲得的信息難以合理分析和分配，則應(yīng)進(jìn)行氨基酸測(cè)序。
中、長(zhǎng)肽應(yīng)進(jìn)行氨基酸組成和氨基酸序列分析。氨基酸序列的一般方法是Edman降解，這是測(cè)定N-末端氨基酸的化學(xué)方法?；诳焖僭愚Z擊、電噴霧、場(chǎng)分析和激光分析質(zhì)譜等多種技術(shù)的質(zhì)譜技術(shù)可以提供多肽的分子量和序列信息，是對(duì)Edman降解的良好補(bǔ)充。
對(duì)于含有20多個(gè)氨基酸殘基的肽，如果不能直接確定其序列，則可根據(jù)肽的分子量和氨基酸組成的特點(diǎn)，利用特定的蛋白水解酶將其分解成小片段，然后對(duì)每個(gè)小片段的序列進(jìn)行分析。
當(dāng)肽含有非天然氨基酸和氨基酸衍生物時(shí)，應(yīng)在結(jié)構(gòu)研究中加以證實(shí)。此時(shí)，應(yīng)在相應(yīng)的研究中研究這些非天然氨基酸和氨基酸衍生物的色譜行為。
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